責(zé)任編輯:本站編輯 來源:中國農(nóng)藥工業(yè)協(xié)會 日期:2011-03-09
測定一種農(nóng)藥藥劑的藥效好壞,可通過室內(nèi)毒力測定和林間藥效試驗。室內(nèi)毒力測定主要是測定一種藥劑的毒性、毒力或比較幾種藥劑毒力的大小。室內(nèi)試驗的結(jié)果,除可作為藥劑的初步篩選的根據(jù)外,還可為林間試驗提供參考。有時在林間發(fā)現(xiàn)的問題必須拿回室內(nèi)作比較精細(xì)的試驗研究。林間試驗主要測定或比較藥劑在林間條件下的藥效,其結(jié)果比較接近實際情況,為生產(chǎn)防治提供可靠的依據(jù)。
1.室內(nèi)毒力測定
進(jìn)行室內(nèi)試驗要注意:①供試生物應(yīng)該是由同一環(huán)境下培養(yǎng)得來的,或采自林間同一環(huán)境的,在生理、發(fā)育上愈一致愈好。②供試藥劑必須純凈(原油或原粉),至少要有確切的有效成分含量。③在控制的條件下進(jìn)行試驗,施藥要均勻一致。④試驗一般要求每種處理有3-5個重復(fù),每個處理要有50-100頭昆蟲(菌類孢子一般為在顯微鏡10×10視野內(nèi)有100個左右,每次計算必須移動玻片檢查3次)。⑤各種試驗必須設(shè)立對照。所設(shè)對照有:完全不處理的(在自然狀況下的),即所謂“空白”對照;不含有效成分的制劑或清水對照,用標(biāo)準(zhǔn)藥劑處理的對照。
(1)殺蟲劑的毒力測定方法
1)噴霧法:模擬林間實際防治情況下而設(shè)計的噴霧方法,為了減少試驗誤差,使每一個供試?yán)ハx盡量接受到相同的藥量,要求噴霧器有一定的壓力,使霧點大小一致,噴霧均勻。
2)液浸法:將供試?yán)ハx分別放入不同濃度的稀釋藥液中浸漬一下,立即取出,放在吸水紙上吸去過多的藥液,移入每一組的盛器中,給以新鮮葉片作飼料,盛器上加蓋紗布或紗網(wǎng),飼養(yǎng)于室內(nèi),記錄室溫,觀察不同時間下中毒死亡情況。
3)藥膜法:將藥劑噴撒在一定面積的表面上,形成一層均勻的藥膜(常用墊有濾紙的培養(yǎng)皿,或?qū)⑨樔~在藥液中浸漬一下后取出),然后讓供試的害蟲在上面,任其與藥膜接觸一定時間后,再移回正常的容器中飼養(yǎng),或就在接觸藥膜過程中,觀察中毒死亡情況。
4)點滴法:用定量的藥液微滴,滴加在供試?yán)ハx的胸部背面,然后定時觀察中毒死亡情況。此法優(yōu)點是:劑量可用每克蟲體接受的藥量(常用微克)表示,藥量容易控制,試驗誤差較??;缺點是費時,處理所用的溶劑、點滴的部位和液滴的大小等都可影響毒力。在采用本法時,應(yīng)當(dāng)考慮這些因素,盡量取得一致,才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。
(2)殺菌劑的毒力測定方法
1)孢子萌發(fā)測定法:將不同的藥液噴布于玻片表面或平板上,定量滴加孢子懸浮液,藥液接觸后,經(jīng)一定培養(yǎng)時間,鏡檢孢子萌發(fā)的百分率。
2)抑菌圈法:將病原菌孢子或菌絲的懸浮液與瓊脂培養(yǎng)基混勻,冷凝后,在培養(yǎng)基平面放上消毒的并蘸有不同濃度藥液的圓形濾紙片(直徑6毫米左右),經(jīng)定溫培養(yǎng)一定時間后,由于藥液的擴散作用,使病菌生長受到抑制,即形成“抑制圈”。測量抑制圈的大小,以比較殺菌劑的毒力。
3)生長速率測定法:在瓊脂培養(yǎng)基中加入藥液,冷凝后接菌的方法,經(jīng)24-48小時后,觀察菌落生長情況,計算生長速率,并與不含藥劑的對照組生長速度相比較。
(3)殺蟲劑、殺菌劑的毒力表示方法:藥劑的殺蟲或殺菌毒力,常用“致死中量”表示,即殺死生物種群半數(shù)(50%)所需用的劑量(median lethal dose,毫克/千克)常簡寫為LD50。如果濃度表示劑量,則為“致死中濃度”,簡寫為LC50。殺菌劑則以ED50或EC50來表示,即抑制50%孢子萌發(fā)所需的劑量或濃度。
在測定藥劑毒力時,一般常用一系列的劑量(或濃度)對多組生物分別測定死亡百分率,再以不同劑量與相應(yīng)的死亡率畫成“劑量-死亡率毒力曲線”。在縱坐標(biāo)從死亡率50%處引出一平行于橫坐標(biāo)的線與曲線相交。該處的劑量(或濃度)即為LD50(或為LC50)。但是由于這一曲線是S形的,不易精確地求得LD50或LC50的數(shù)值,同時用S形曲線也不易與其他曲線進(jìn)行比較。因此,必須把這一呈S形曲線改成一條直線,常用統(tǒng)計方法是將劑量用對數(shù)值表示,將死亡率用機率值表示,就可以將S形曲線改為一根直線,這一根直線常稱“劑量對數(shù)-機率值直線”。死亡率查機率(見附表2機率與死亡百分率換算表)。從這一直線的坡度,還可得知供試生物對該種藥劑敏感性差異的程度,即坡度越大,表示供試生物個體間差異越小;坡度越小,表示差異越大。
室內(nèi)毒力測定時,在不施藥的對照組中,出常出現(xiàn)少數(shù)自然死亡的個體,如果自然死亡率在5%以下,一般僅把處理組的死亡率減去自然死亡率即可得到校正死亡率。當(dāng)自然死亡率達(dá)到5%~20~時,就不能用直接相減的方法,應(yīng)按照下列公式計算處理組的校正死亡率,如果自然死亡率超過20%時,則該批供試生物不宜作試驗或試驗應(yīng)重做。
對照組生存率-處理組生存率
處理組的校正死亡率(%)=---×100%
對照組生存率
2.林間藥效試驗
林間藥效試驗的小區(qū)或大區(qū)的面積大小,取決于地形條件、林木種類、病蟲習(xí)性和試驗要求。用藥處理前后,必須調(diào)查病蟲害為害程度的變化,通常采用“隨機取樣” 方法調(diào)查,常有對角線法、大五點法、棋盤式法、平行線法、分行法等。病蟲害發(fā)生比較普遍,分布比較均勻,危害較重,可采用五點取樣法或棋盤式法;病蟲害分布不均衡,形成大小及形狀不相同的核心分布型,并自核心向外放射性蔓延,可采用平行線法。取樣大?。ㄈ鐦?biāo)準(zhǔn)株數(shù))直接關(guān)系到結(jié)果的正確程度,應(yīng)根據(jù)具體條件、病蟲種類等情況,決定取樣大小。例如調(diào)查金毛蟲蟲口密度時,蟲口密度大的,抽標(biāo)準(zhǔn)株數(shù)少些;蟲口密度小的,抽標(biāo)準(zhǔn)株數(shù)多些,一般約20-30株。
藥效試驗結(jié)果,最常用的是害蟲死亡率、蟲口減退率、枯梢率等。病害試驗結(jié)果可用發(fā)病率、普遍率、感染指數(shù)等表示。一般當(dāng)害蟲蟲口密度基本上是一定的,則處理后的蟲口數(shù)一定減少,而不會增加。對這類害蟲試驗結(jié)果的統(tǒng)計,只要計算死亡率或蟲口減退率即可。
害蟲死亡率(或蟲口減退率)(%)
施藥前害蟲平均活蟲數(shù)—施藥后害蟲平均活蟲數(shù)
=----×100%
施藥前害蟲平均活蟲數(shù)
當(dāng)自然死亡率在5%-20%,應(yīng)進(jìn)行校正。為此,在試驗設(shè)計時應(yīng)加不施藥的對照區(qū),這樣就能計算校正死亡率或校正蟲口減退率。
害蟲校正死亡率
施藥區(qū)死亡率(減退率)-不施藥對照區(qū)死亡率(減退率)
=--- ×100%
100-不施藥對照區(qū)死亡率(減退率)
另一類害蟲(主要是蚜、螨)。它們的繁殖力很加,不僅對照區(qū)蟲口數(shù)要比施藥前增加,就是施藥區(qū)的蟲口數(shù)也有減有增。因此,運用上述校正死亡率或校正蟲口減退率(%)公式時,凡遇不施藥對照區(qū)蟲口數(shù)增加的,則在公式中改用“+”號。
殺菌劑藥效試驗的調(diào)查及結(jié)果的處理方法也因病害種類、危害性質(zhì)而異。如苗期病害,可隨機或定點取樣,檢查一定數(shù)量的苗株,計算發(fā)病率。根據(jù)施藥前、后的發(fā)病率,計算病害減退率或防治效果。
病苗(株、葉、稈)數(shù)
發(fā)病率(或普遍率)(%)= ---×100%
檢查苗(株、葉、稈)數(shù)
有些病害如落針病、葉斑病等,因同一植株上或不同植株上危害程度有輕重之別,可根據(jù)落針數(shù)或葉上的病斑數(shù),分成若干等級,例如分為0、1、2、3、4、5等六級,級數(shù)可按具體情況或多或少。分別檢查藥劑防治區(qū)別和不施藥對照區(qū)的各級病葉數(shù),計算防治區(qū)和對照區(qū)的病指情指數(shù)。計算方法如下:
∑(級別代表值×本級病株數(shù))
病情指數(shù)(或感病指數(shù))(%)=---×100%
檢查總株數(shù)×最高級別代表值
式中:∑是各級乘積數(shù)值的總和。
用病情指數(shù)進(jìn)一步計算防治效果:
對照區(qū)病情指數(shù)(或發(fā)病率)-防治區(qū)病情指數(shù)(或發(fā)病率)
防治效果(%)=---×100%
對照區(qū)病情指數(shù)(或發(fā)病率)
關(guān)于除草劑的除草效果可用下式計算:
對照區(qū)雜草數(shù)量(鮮重,克)-施藥區(qū)雜草殘留量(鮮重,克)
防治效果(%)=---×100%
對照區(qū)雜草數(shù)量(鮮重,克)
中國農(nóng)藥工業(yè)網(wǎng) 版權(quán)所有
地址:北京市朝陽區(qū)農(nóng)展館南里通廣大廈7層
電話:010-84885233 京公網(wǎng)安備11010502025163